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Elisa試劑盒的相關知識點擴展介紹
點擊次數:525 更新時間:2023-02-02
  Elisa試劑盒是將純化的ins抗體包入微孔板中制成固相載體。將樣品或標準物質、ins抗體和HRP標記的親和元件依次加入微孔中,洗滌后用底物(TMB)顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉為藍色,在酸的作用下轉為黃色。顏色的深度與樣品中的INS呈正相關。用酶標儀在450nm波長處測定吸光度(值),計算樣品濃度。
 
  Elisa試劑盒的相關知識點擴展:
 
  1.試劑的儲存與穩定性
 
  所有打開的試劑在2-8℃下保存,保質期內不允許過期。所有打開的試劑應儲存在2-8℃。一旦微孔板的包裝打開,就需要重新密封。
 
  2.樣品的準備
 
  將所有的試劑和所需要的板條在使用前平衡至室溫。
 
  洗滌液:用1170ml的蒸餾水稀釋30ml濃縮的洗滌液,終得到的容積為1200ml,稀釋好的洗滌液在室溫下可穩定存放兩個星期。
 
  3.樣品的收集
 
  此ELISA試劑盒可使用血清也可使用(只有肝素或檸檬酸鹽抗凝的血漿)血漿作為樣品。
 
  不能使用明顯溶血﹑黃疸和脂血的樣品。
 
  血清:靜脈穿刺采集全血,待其凝血,在室溫下離心分離血清。
 
  血漿:將全血采集到含有抗凝劑的離心管,采集后立即離心分離。
 
  4.樣品的儲存:
 
  樣品蓋好蓋子后,可在實驗前2-8℃下儲存5天,要更長時間儲存,應在-20℃下凍存。在開始實驗前應避免反復凍融樣品。
 
  5.樣品的稀釋:
 
  在初次試驗中,如果樣品的濃度高于高標準,則應按照試驗程序的規定將樣品稀釋10倍或100倍。計算濃度時,稀釋度乘以此值。
 
  例子:
 
  a)按1:10稀釋:10μL的血清+90μL的零標準品(充分搖勻)。
 
  b)按1:100釋稀:10μL按a)稀釋的血清+90μL的零標準品(充分搖勻)

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