當(dāng)前位置：TSZ Elisa試劑盒檢測系統(tǒng)是免疫學(xué)反應(yīng)應(yīng)用到科研中zui為靈敏的技術(shù)手段，有著十分重要的作用。操作步驟雖然看起來比較簡單但是實驗過程有很多的操作要點需要掌握，操作步驟中如果稍有不慎，操作不合理的地方，就會造成很多問題從而影響到檢測的準(zhǔn)確性，大大降低試驗質(zhì)量。比如說花板，假陽性，全顯色，全部顯色，顯色比空白還低……這就需要我們在實驗過程中多做總結(jié)，逐步完善，還有就是要多多學(xué)習(xí)，分享學(xué)習(xí)心得。下面就大體總結(jié)一下ELISA實驗的常見問題和解決方法，同大家一起分享。
、包被原的性質(zhì)很重要，蛋白濃度，是否降解，這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識別，所以保存抗原很重要，我做重組蛋白時，師兄都嚴(yán)格警告我一定要在冰浴下緩慢融化就是這個道理。還有有的包被原可能不是蛋白，對于和脂類物質(zhì)或小分子物質(zhì)我們要事先對其改造再加以包被，我把方法簡要的列出如下:①親和素:先親和素先包被載體，加入化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。②脂類物質(zhì):可將其在有機(jī)溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風(fēng)吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面。③小分子必須依靠和大的蛋白載體偶聯(lián)后才能固定在固相載體上。
2、包被液的選擇，一般選擇ph9.6的碳酸鹽緩沖液。但有時由于試驗的需要，包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖溶液來包。應(yīng)注意以下原理：由于蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用，TSZ Elisa試劑盒這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點、濃度等的影響，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。具體的試驗還要有堅固的理論外也要實踐，看一下zui終可不可以應(yīng)用到自己試驗當(dāng)中去。常用的包被液除了剛才提到的pH9.6碳酸鹽緩沖液，還有pH7.2的磷酸鹽緩沖液和pH7-8的Tris-HCL緩沖液等等。
bis(2-methoxyethyl)amine 對異氰酸酯 40736 Methyl Isovalerate
雙(2-甲氧基乙基)胺 04-2- 40737 methyl levulinate
-95-5 4-chlorobenzylmethylamine 40738 Methyl Mercaptan
Di-n-butylamine N-甲基-4-氯芐胺 40739 methyl o-anisate
二丁胺 04--0 40746 Methyl pentafluoropropionate
-92-2 p-aminophenylethanol 40747 Methyl pentanoate
2-(2-Ethoxyethoxy)ethanol 對氨基苯乙醇 40749 Methyl propionate
二甘醇單 04-0-9 40750 methyl p-tolyl sulphide
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