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豬粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)酶聯免疫elisa試劑盒規格

豬粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)酶聯免疫elisa試劑盒規格

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豬粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)酶聯免疫elisa試劑盒規格 詳細資料

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產品名稱:豬粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)酶聯免疫elisa試劑盒規格
英文名稱: MUC5AC ELISA Kit
規格:96T/48T
存儲條件:2-8℃
有效期:6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關蛋白無交叉反應。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床 。

豬粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)酶聯免疫elisa試劑盒規格類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測抗體、
(四)競爭法。
豬粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)酶聯免疫elisa試劑盒規格標本要求
.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后5分鐘以內進行。
豬粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)酶聯免疫elisa試劑盒規格技術流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標抗體:于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。

QO    重組人 NQO / DT-diaphorase 蛋白 (His 標簽)    FastDigest® SacI
NMNAT    重組人 NMNAT / NMNAT 蛋白 (His 標簽)    FastDigest® TaiI
SPOCK    重組人 SPOCK / Testican 蛋白 (aa 2-429, His 標簽)    FastDigest® NlaIV (BspLI)
NAA0    重組人 NAA0 / ARDA 蛋白    FastDigest® SfcI (BfmI)
TNFRSF8    重組人 GITR / TNFRSF8 蛋白 (Fc 標簽)    FastDigest® Bpu0I
GPNMB    重組人 GPNMB / Osteoactivin 蛋白 (Fc 標簽)    FastDigest® SbfI (SdaI)
CD27    重組人 CD27 / TNFRSF7 蛋白 (His 標簽)    FastDigest® BslI (BseLI)
DCBLD    重組人 Discoidin / DCBLD 蛋白 (His 標簽)    FastDigest® MscI (MlsI)
KLHL2    重組人 KLHL2 蛋白 (GST 標簽)    FastDigest® FspI (NsbI)
FHIT    重組人 Fragile histidine triad / FHIT 蛋白 (His 標簽)    FastDigest® DraIII (AdeI)
TPPP3    重組人 TPPP3 蛋白 (His 標簽)    FastDigest® SwaI (SmiI)
PFDN2    重組人 PFD2 / PFDN2 蛋白 (His 標簽)    FastDigest® SpeI (BcuI)
SUB    重組人 SUB 蛋白 (His 標簽)    FastDigest® SpeI (BcuI)
RYBP    重組人 APAP- / AAP / RYBP 蛋白 (His & GST 標簽)    FastDigest® BsrDI (BseMI)
DARS    重組人 DARS 蛋白 (His 標簽)    FastDigest® BsrBI (MbiI)
TBCB    重組人 TBCB 蛋白 (His 標簽)    FastDigest® BspHI (PagI)
ESD    重組人 Esterase D / ESD 蛋白 (His 標簽)    FastDigest® TatI
LSM    重組人 LSM 蛋白 (His 標簽)    FastDigest® EcoNI (XagI)2-26    XL-0 gold 菌種    mL
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